Izravna kvantifikacija proteina iz spektrofotometara (UV metoda)
Ova metoda je testirati protein izravno na valnoj duljini od 280 nm. Odaberite Warburgovu formulu, fotometar može izravno pokazati koncentraciju uzorka ili odabrati odgovarajući način konverzije da bi se vrijednost apsorbancije pretvorila u koncentraciju uzorka. Postupak određivanja proteina je vrlo jednostavan. Prvo provjerite prašinu i zatim izravno testirati protein. Zbog prisustva nekih nečistoća u puferu, "pozadinska" informacija na 320 nm općenito se eliminira i ta je funkcija podešena na "ON". Slično ispitnoj nukleinskoj kiselini, vrijednost apsorbancije A280 mora biti barem veća od 0,1 A, a optimalni linearni raspon je između 1,0-1,5. Kada je Warburgova formula upotrijebljena za pokazivanje koncentracije uzorka u eksperimentu, nađeno je da je čitanje "drift". Ovo je normalan fenomen. U stvari, sve dok promatranje apsorbancije A280 ne prelazi 1%, rezultat je vrlo stabilan. Razlog za pomicanje je da se apsorpcijska vrijednost Warburgove formule pretvori u koncentraciju i pomnoži s određenim faktorom. Sve dok postoji mala promjena vrijednosti apsorpcije, koncentracija će se pojačati i rezultat će biti vrlo nestabilan. Metode izravne kvantifikacije proteina pogodne su za ispitivanje relativno čistih, relativno jednodijelnih proteina. UV izravan kvantifikacija je brža i jednostavnija za izvođenje nego kolorimetrija; međutim, podložna je smetnji paralelnih tvari, kao što je DNK smetnje, a niska osjetljivost zahtijeva visoke koncentracije proteina.
Tvrtka je specijalizirana za prodaju spektrofotometara , dobrodošlicu kupcima koji imaju potrebu za savjetovanjem i kupnjom, pružit ćemo vam iskrenu uslugu i kvalitetne proizvode, kao i niže cijene.
E-mail: info@sumerlab.com
Web: sumerinstrument.com